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中國(guó)人自己的單細(xì)胞測(cè)序儀來(lái)了!
發(fā)布時(shí)間:2018-06-27 來(lái)源: 編輯:admin
過(guò)去兩年有一項(xiàng)大熱的技術(shù),大量研究人員通過(guò)這項(xiàng)技術(shù)解決重要科學(xué)問題,發(fā)表了大量高水平學(xué)術(shù)文章,這項(xiàng)技術(shù)便是單細(xì)胞測(cè)序技術(shù)。
 
單細(xì)胞測(cè)序技術(shù),在這兩年得到了蓬勃發(fā)展。一些高通量的單細(xì)胞測(cè)序平臺(tái)開始為大家所熟知。有10×genomics單細(xì)胞測(cè)序平臺(tái)、以及Fluidigm、WaferGen、Illumina/Bio-Rad等。
這些平臺(tái)在很大程度上降低了單細(xì)胞測(cè)序的成本,使得單個(gè)細(xì)胞的測(cè)序成本變得極低。雖然單個(gè)細(xì)胞的成本降低了,但一個(gè)樣本需要產(chǎn)生大量細(xì)胞的數(shù)據(jù),所以單個(gè)樣本的成本并沒有很低。大多數(shù)的研究者會(huì)因這幾十萬(wàn)甚至上百萬(wàn)的測(cè)序成本而對(duì)單細(xì)胞測(cè)序研究望而卻步。有些希望從事單細(xì)胞研究或者希望提供單細(xì)胞測(cè)序服務(wù)的單位,也會(huì)因?yàn)闇y(cè)序平臺(tái)高昂的價(jià)格而猶豫不決。

大家所熟知的10×genomics單細(xì)胞胞測(cè)序平臺(tái)依托的技術(shù)手段稱之為inDrop-seq,論文在2015年發(fā)表與Cell雜志。該方法利用微液滴技術(shù)將帶有條形碼、索引分子、引物及其他的凝膠珠與單細(xì)胞混合。每個(gè)液滴內(nèi)開展逆轉(zhuǎn)錄反應(yīng),以產(chǎn)生測(cè)序所用的帶有條形碼的cDNA。
 
10×genomics單細(xì)胞測(cè)序平臺(tái)原理圖
有意思的是,凈信使用的Drop-seq技術(shù)與inDrop-seq技術(shù)發(fā)表與同一期的Cell雜志上。Drop-seq也是利用微流控技術(shù)將細(xì)胞分開,并與帶有特定條形碼的磁珠混合。磁珠上的Poly(dT)將細(xì)胞內(nèi)的信使RNA捕獲。收集磁珠凈信逆轉(zhuǎn)錄和擴(kuò)增,得到測(cè)序所用的帶有條形碼的cDNA。與inDrop-seq不同的是,Drop-seq的逆轉(zhuǎn)錄的過(guò)程是在液滴外進(jìn)行的,這樣逆轉(zhuǎn)錄的效率會(huì)更高。
 
凈信單細(xì)胞測(cè)序儀原理圖

 
凈信單細(xì)胞測(cè)序儀 樣機(jī)圖
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